長(zhǎng)臂生物素標(biāo)記試劑盒

使用說(shuō)明書

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

第1版（2016年04月修訂）

關(guān)聯(lián)信息

生物素和親和素系統(tǒng)作為最為常見的的信號(hào)放大系統(tǒng)，在生化檢測(cè)中被廣泛使用。為解決由于空間位阻效應(yīng)產(chǎn)生的生物素和親和素難以結(jié)合和結(jié)合效率低等問(wèn)題，武漢云克隆研發(fā)了帶有NH2-長(zhǎng)臂的生物素標(biāo)記試劑盒，一方面它保留了原有生物素特性，另一方面它減小了空間位阻，使生物素和親和素的結(jié)合效率更高。

試劑盒包含過(guò)濾管和相關(guān)的試劑，滿足6次0.1-1mg 的蛋白或抗體的標(biāo)記，標(biāo)記過(guò)程不需透析，操作簡(jiǎn)便。

試劑盒組分

組分	規(guī)格
試劑A	30 ml
試劑B	1 ml
試劑C	100ul
NH2-長(zhǎng)臂生物素	6管
過(guò)濾管	2ml*6管
說(shuō)明書	1儲(chǔ)存及有效期

2-8℃，試劑盒質(zhì)保期一年。

操作步驟

1、將待生物素化的蛋白質(zhì)或抗體和試劑A按v:v=1~2共計(jì)2ml加入過(guò)濾管內(nèi)管中，7500g離心10分鐘，棄去外管內(nèi)液體。利用試劑A補(bǔ)足2ml，7500g離心10分鐘， 收集過(guò)濾管內(nèi)管中液體。

2、用試劑A將樣品濃縮液稀釋到1mg/ml（如果濃縮液濃度過(guò)低需要進(jìn)一步濃縮），再吸取1ml 稀釋好的樣本放入過(guò)濾管內(nèi)管中。

3、向裝有NH2-長(zhǎng)臂生物素的EP管中加入150ul 的試劑B，使管內(nèi)粉末充分溶解。 取120ul混合液加入到過(guò)濾管內(nèi)管中，充分混勻。

4、室溫持續(xù)震蕩混勻3-4小時(shí)。

5、加入9.6ul的試劑C，室溫持續(xù)震蕩混勻10分鐘。

6、7500g離心10分鐘，棄去外管內(nèi)液體，收集內(nèi)管中的液體用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)

1、過(guò)濾管允許分子量≤10KDa的分子通過(guò)，所以請(qǐng)注意被標(biāo)記物的分子量。

2、本試劑盒還可以用于分子量適中，能與-NH2進(jìn)行反應(yīng)的其他物質(zhì)。

3、當(dāng)NH2-長(zhǎng)臂生物素與活性蛋白的活性中心部位以及活性中心區(qū)域的氨基酸結(jié)合可能導(dǎo)致蛋白失活，對(duì)于此種蛋白請(qǐng)務(wù)必更換其他方式進(jìn)行標(biāo)記。

4、NH2-長(zhǎng)臂生物素在溶解前請(qǐng)離心，防止粉末吸附在管壁和管蓋上。

5、被標(biāo)記物量比較少的情況下，為減少樣本的損失，建議使用透析的方法。