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中期因子(MK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

ELISA Kit for Midkine (MK)

MDK; ARAP; NEGF2; Neurite Growth-Promoting Factor 2; Amphiregulin-associated protein; Midgestation and kidney protein; Neurite outgrowth-promoting factor 2

  • 中期因子(MK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • 中期因子(MK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • 中期因子(MK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖
  • SEA631Mu.jpg 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
  • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證

特異性

本試劑盒用于檢測中期因子(MK),經(jīng)檢測與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應(yīng)。
由于受到技術(shù)及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測,因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的中期因子(MK)(加標(biāo)樣品),重復(fù)測定并計(jì)算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 86-99 91
EDTA plasma(n=5) 86-99 96
heparin plasma(n=5) 87-103 97

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10%
批間差: CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的中期因子(MK),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中中期因子(MK)含量的測定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 88-97% 89-97% 82-93% 80-97%
EDTA plasma(n=5) 78-93% 97-104% 81-103% 90-98%
heparin plasma(n=5) 87-99% 89-98% 90-98% 98-105%

穩(wěn)定性

經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。

實(shí)驗(yàn)流程

1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。

實(shí)驗(yàn)原理

將中期因子(MK)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的中期因子(MK)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入生物素化的中期因子(MK)抗體,將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記的親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的中期因子(MK)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。

相關(guān)產(chǎn)品

編號 適用物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 應(yīng)用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!)
RPA631Mu01 中期因子(MK)重組蛋白 Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
RPA631Mu02 中期因子(MK)重組蛋白 Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
PAA631Mu01 中期因子(MK)多克隆抗體 WB; IHC; ICC; IP.
PAA631Mu02 中期因子(MK)多克隆抗體 WB; IHC; ICC; IP.
LAA631Mu71 中期因子(MK)多克隆抗體(生物素標(biāo)記) WB; IHC; ICC.
LAA631Mu81 中期因子(MK)多克隆抗體(異硫氰酸熒光素標(biāo)記) WB; IHC; ICC; IF.
SEA631Mu 中期因子(MK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) Enzyme-linked immunosorbent assay for Antigen Detection.
LMA631Mu 中期因子(MK)等多因子檢測試劑盒(流式熒光發(fā)光法) FLIA Kit for Antigen Detection.
KSA631Mu01 中期因子(MK)檢測試劑盒DIY材料(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) Main materials for "Do It (ELISA Kit) Yourself".

參考文獻(xiàn)

雜志 參考文獻(xiàn)
Midkine: From Embryogenesis to Pathogenesis and Therapy Immunochemical Methods for the Detection of Midkine in Samples of Human Origin [Springer: Source]
33 Midkine Controls Arteriogenesis by Regulating the Bioavailability of Vascular Endothelial Growth Factor A and the Expression of Nitric Oxide Synthase 1 and … [10.1016:j.ebiom.2017.11.020]
Circulation Journal Midkine Promotes Atherosclerotic Plaque Formation Through Its Pro-Inflammatory, Angiogenic and Anti-Apoptotic Functions in Apolipoprotein E-Knockout Mice [pubmed:28781288]
EBioMedicine Midkine Controls Arteriogenesis by Regulating the Bioavailability of Vascular Endothelial Growth Factor A and the Expression of Nitric Oxide Synthase 1 and?… [Pubmed:29233575]
Journal of Clinical Laboratory Analysis Clinical value of jointly detection pleural fluid Midkine, pleural fluid adenosine deaminase, and pleural fluid carbohydrate antigen 125 in the identification of nonsmall?… [Pubmed:29797475]
Charakterisierung der funktionalen Rolle des Zytokins Midkine bei der Arteriogenese [:]
Scientific Reports The possible role of Dickkopf-1, Golgi protein-73 and Midkine as predictors of hepatocarcinogenesis: a review and an Egyptian study [Pubmed: 32198440]
Odontology Effects of different pulp-capping materials on cell death signaling pathways of lipoteichoic acid-stimulated human dental pulp stem cells [Pubmed: 33206337]
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