血管鈣化(VC)大鼠模型
Rat Model for Vascular Calcification (VC)
- 編號(hào)DSI845Ra01
- 物種Rattus norvegicus (Rat，大鼠) 相同的名稱(chēng)，不同的物種。
- 原型物種Human
- 來(lái)源維生素D3(Vitamin D3) 導(dǎo)致
- 模式動(dòng)物品系SPF級(jí)SD大鼠，健康，6~8W，雄性，體重180g-200g
- 實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分六組：正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組、受試藥組三個(gè)劑量組
- 實(shí)驗(yàn)周期8 weeks
- 建模方法血管鈣化動(dòng)物模型
每日維生素D3(Vitamin D3) 30萬(wàn)IU/kg體重肌肉注射，連續(xù)四周；
每日尼古丁灌胃兩次：將尼古丁溶于花生油灌胃（25mg/kg），9h后再灌胃1次，連續(xù)四周。
注意事項(xiàng)：
維生素D3主要造成血管鈣化，尼古丁刺激心跳加速血壓升高每次灌胃完都要觀(guān)察動(dòng)物狀態(tài)，老鼠灌胃后會(huì)抽搐，需要人工按壓給緩解。
血漿制備：模型制備結(jié)束，各組大鼠用戊巴比妥鈉深度麻醉大鼠，腹主動(dòng)脈取血，注入含7.5%EDTA 二鈉30ul、40ul 和抑肽酶40ul 的試管中，離心分離血漿。-20℃保存待測(cè)。
組織制備：各組大鼠取血后處死，取大鼠胸主動(dòng)脈段，置入4%多聚甲醛固定液中，脫水，石蠟包埋，切片，備用
病理組織進(jìn)行Von Kossa染色。 - 應(yīng)用疾病模型
- 下載 英文說(shuō)明書(shū) 中文說(shuō)明書(shū)
- 規(guī)格 每例
- 價(jià)格 ¥ 1560
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產(chǎn)品包裝(模擬)
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產(chǎn)品包裝(模擬)
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Fig.Von Kossa staining of Aortic vessels in model rat
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通過(guò)ISO 9001、ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證
模型評(píng)價(jià)
1.血管鈣含量測(cè)定: 取10mg腹主動(dòng)脈溶于硝酸消化、烤干，用含有
27nmol/LKCl和 27μmol/L LaCl3的去離子水復(fù)溶，用原子分光光度計(jì)在442.7nm
處讀取吸光度，后換算成組織鈣含量(以μmol/gdw 表示)
2.ALP活性測(cè)定：取腹主動(dòng)脈勻漿，8000×g離心10 min，取上清液?？捡R
斯亮藍(lán)法蛋白定量。按試劑盒說(shuō)明方法測(cè)定血管組織ALP活性，紫外分光光度計(jì)
在405nm處讀取吸光度。具體步驟：加入緩沖液，370C孵育30min，NaOH終止反應(yīng)，測(cè)定405nm下的吸收值。ALP活性用p2硝基苯酚為標(biāo)準(zhǔn)值計(jì)算，1單位表示30min內(nèi)產(chǎn)生1nM硝基酚的活性。BCA法測(cè)定總蛋白定量，校正ALP活性。
組織病理學(xué)
病理組織Von Kossa染色:
取大鼠胸主動(dòng)脈段，用石蠟包埋胸主動(dòng)脈后切片，４μｍ厚切片，常規(guī)脫蠟、脫水。1%硝酸銀溶液浸泡，日光下照射30min后，將玻片浸入5%硫代硫酸鈉溶液1min，后用堿性品紅返染。脫水、透明、封片，用光鏡觀(guān)察。
主動(dòng)脈鈣化面積百分比測(cè)算：取主動(dòng)脈弓至胸主動(dòng)脈段血管1cm，沿縱
軸剪開(kāi)后Von Kossa 染色，用Image-Pro Plus 6.0 病理圖像分析軟件計(jì)算各實(shí)驗(yàn)
組大鼠鈣化斑塊面積百分比。
免疫組化法觀(guān)察RUNX2、BMP2、RANK/RANKL/OPG水平：DAB顯
色，蘇木素復(fù)染，常規(guī)梯度乙醇脫水，中性樹(shù)膠封片觀(guān)察。陰性對(duì)照以PBS代替一抗進(jìn)行染色。每只大鼠隨機(jī)取3張結(jié)腸切片，每張切片光學(xué)顯微鏡下隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野，統(tǒng)計(jì)每個(gè)視野中陽(yáng)性組織細(xì)胞的積分光密度值(IOD值)與檢測(cè)面積的比值，即平均光密度值(MOD)，以代表染色強(qiáng)度。
標(biāo)志因子水平
Western blot 檢測(cè)RUNX2、BMP2、RANK/RANKL/OPG 蛋白表達(dá)
統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x ±ｓ）表示，采用ｔ檢驗(yàn)，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05表示有顯
贈(zèng)品
增值服務(wù)
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